本文繼續就上一期線粒體膜電位（MMP）檢測的內容進行介紹。目前市面上已有的線粒體探針越來越豐富。針對不同類型的有機熒光探針的設計理念、響應機理和檢測方法，我們將其分為單色探針（monochromatic probes）、比例探針（ratiometric probes）和靶開關探針（target-switchable probes）。本文針對單色探針進行較為通俗的介紹。

單色熒光探針顧名思義就是一種識別顏色的探針。這種探針可以通過熒光強度的變化來監測MMP水平。根據熒光強度的變化情況（或淬火模式與非淬火模式的不同），探針又可分為開關探針（on-off probe）和關開探針（off-on probe）。

開-關熒光探針是經典的MMP檢測工具，具有聚集致猝滅（aggregation-caused quenching，ACQ）特性。在淬滅模式中，使用高負載濃度的探針對細胞進行染色，使其在線粒體中積聚足夠的濃度，形成聚集物，使熒光淬滅。因此，在高MMP水平時，探針集中在線粒體中，發出微弱的熒光。當MMP降低時，部分探針從線粒體釋放到細胞質中，線粒體中的熒光探針濃度降低，導致熒光強度增加。直至熒光強度達到最高，然后隨著MMP的丟失與熒光信號丟失而下降。因此，開-關熒光探針熒光強度與MMP成反相關，MMP越低，熒光值越高；MMP越高，熒光值越低。

相比之下，在非猝滅模式下，采用較低的加載濃度，探針在正常MMP水平顯示出較強的熒光信號。隨著MMP的減少，熒光強度下降。因此，關開探針的熒光強度與MMP的強弱是正相關的，即：熒光值越高，MMP越高；熒光值越低，MMP越低。

下圖便于理解這兩種類型的探針。

2011年Harris等人使用Rhod 123染色大鼠初級皮質神經元。選擇Rhod 123的加載濃度為10μM，該濃度高到足以形成聚集體。孵育30分鐘后，清洗去除多余探針，37℃下靜置15分鐘，使Rhod 123熒光強度達到穩定狀態。然后在細胞中加入寡霉素（Oligomycin）增加MMP，由于聚集猝滅的ACQ作用，熒光強度下降。之后加入羰基-氰-對-三氟甲氧基苯腙（FCCP），降低MMP，熒光強度增加（見下圖）。

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